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可能影響酶免疫測定ELISA結(jié)果的標(biāo)本內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素一般包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)等。在日常的臨床血清（漿）標(biāo)本中，有相當(dāng)比例不同程度的含有上述各種干擾物質(zhì)，從而導(dǎo)致測定結(jié)果的假陽性。1．類風(fēng)濕因子（rheumatoidfactors，RF）在類風(fēng)濕患者、其他疾病以及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的RF，RF一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變...

微量加樣器（移液器）使用的一般原則在免疫測定及其他生物醫(yī)學(xué)研究中，加樣器的使用離不開一次性的塑料吸頭，盡管一次性塑料吸頭的使用增加了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用，但降低了實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員接觸傳染性病原體及有害實(shí)驗(yàn)材料如放射性核素的可能性，并且避免了吸頭多次重復(fù)使用所必需的清潔過程和腐蝕性去垢劑的使用。此外，在有些應(yīng)用上，如PCR測定中，吸頭必須是一次性的，以避免潛在污染發(fā)生的可能性。加樣器根據(jù)使用的要求，也在不斷發(fā)展。如可整體高壓滅菌加樣器的出現(xiàn)。使用UV線穩(wěn)定的塑料制作加樣器對于加樣器在許多方面的...

酶標(biāo)記抗體法標(biāo)記抗體的制備酶標(biāo)記抗體法（enzaymelabelledantibodytechnique）是用結(jié)合物將酶結(jié)合在抗體分子上，制備成酶標(biāo)記抗體，通過抗原—抗體反應(yīng)使抗原—抗體復(fù)合物上帶有酶分子，再借助酶對底物的特異性催化作用，在抗原—抗體反應(yīng)部位形成不溶性有色產(chǎn)物，用于研究抗原物質(zhì)分布和性質(zhì)。酶標(biāo)記抗體法又分為直接法和間接法，目前應(yīng)用zui多的酶是辣根過氧化酶（HRP），底物是3，3’—二氨基聯(lián)苯胺（DAB）。抗體蛋白分子與酶分子（如HRP或AKP）以一定的方式相...

哺乳動物細(xì)胞的RNAi技術(shù)策略目前RNAi技術(shù)已經(jīng)進(jìn)入了生物科學(xué)研究的許多領(lǐng)域，成為了一種主要的生物學(xué)研究工具，發(fā)展得相當(dāng)迅速，并受到了此次諾貝爾獎評審委員會的青睞，獲得2006年諾貝爾獎醫(yī)學(xué)/生理獎。然而這一才歷經(jīng)十個年頭的技術(shù)依然對于許多研究人員來說還是很陌生的，以下是有關(guān)RNAi技術(shù)在哺乳動物細(xì)胞中應(yīng)用的具體設(shè)計(jì)策略，主要來自于《遺傳》雜志2005年“RNA干涉（RNAi）技術(shù)應(yīng)用于哺乳動物細(xì)胞的研究策略”，希望能給從事或者準(zhǔn)備從事RNAi相關(guān)實(shí)驗(yàn)的研究人員以幫助。哺乳...

生物素-親和素系統(tǒng)（BAS）ELISA和免疫組化技術(shù)20世紀(jì)70年代后期在免疫酶技術(shù)中利用生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidinsystem，BAS）標(biāo)記抗體發(fā)展了又一種新型生物反應(yīng)放大技術(shù)，即BAS-ELISA技術(shù)，它使用生物素-親和素-過氧化物酶復(fù)合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進(jìn)一步提高檢測的敏感度。生物素（biotin）是廣泛分布于動植物體內(nèi)的一種生長因子，又稱輔酶R或維生素H。親和素（avidin）是卵白及某些微生物中的一種蛋白質(zhì)，由4個亞單位組成。二...

PCR-ELISA法診斷禽流感PCR-ELISA是將一步RT-PCR技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附法相結(jié)合，檢測病毒的一項(xiàng)診斷技術(shù)。PCR的一對引物中，其中一個用生物素標(biāo)記、另一個用地高辛標(biāo)記，在酶標(biāo)微孔板上用親和素包被，PCR擴(kuò)增后純化片段加入微孔板中。此時，微孔板上包被的親和素將與生物素標(biāo)記引物上的生物素特異性結(jié)合而捕捉了PCR片段，然后在微IL板中加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗地高辛抗體，該抗體將與地高辛標(biāo)記引物上的地高辛結(jié)合，從而形成親和素-生物素-PCR片段-地高辛-地高辛抗體-辣...