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酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病
2011-11-1
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酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)診斷豬囊尾蚴病病目前實驗室開發(fā)的新型檢測方法主要是以ELISA及改良的ELISA為主。分別用5種不同改良的ELISA平行檢測囊蟲抗體:ABC-ELISA、經(jīng)典ELISA、SPA-ELISA、快速法ELISA和BAELISA,試驗結(jié)果差異不顯著,說明方法學的選擇主要依據(jù)習慣和試驗的目的。N.S.Odashima(2002)用ELISA法診斷不同的患者群血清中抗體的種類,發(fā)現(xiàn)ELISA—lgG敏感度zui高,分別達到88.5%和93.2%,這說明該方...
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酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集
2011-10-26
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酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA操作中標本的收集用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清(漿)標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集,要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4:00—6:00之間,會有一峰值出現(xiàn);生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)...
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酶標抗體的質(zhì)量鑒定與保存
2011-10-24
1493
酶標抗體的質(zhì)量鑒定與保存1.酶活性和抗體效價測定采用雙向免疫擴散法(稀釋抗體)和DAB-H2O2顯色反應檢測結(jié)合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反應。2.酶量和IgG量酶量(mg/ml)=OD403′0.4IgG量(mg/ml)=(OD280-OD402′0.42)′0.94′0.62其中,0.42為酶蛋白本身(0.3)及結(jié)合戊二醛后增加的OD值,0.94為抗體蛋白與醛化酶結(jié)合后,OD280約增加6%,故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0時為0.62.過碘酸鈉標記法I...
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ELISA法檢測干擾素
2011-10-20
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ELISA法檢測干擾素干擾素(IFN)是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì),僅在同種細胞上發(fā)揮作用。根據(jù)其來源、理化及生物學性質(zhì)的不同,可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中,IFN-α主要由白細胞產(chǎn)生,IFN-β由成纖維細胞產(chǎn)生,IFN-γ主要由T細胞在免疫應答中受到抗原或絲裂原活化后分泌產(chǎn)生。3種干擾素中,IFN-α、IFN-β抗病毒作用較強,IFN-丁免疫調(diào)節(jié)作用較強。目前已可用基因重組技術(shù)制備干擾素投入臨床使用。干擾素不能直接滅活病毒,其抗病毒作用是由于...
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通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆
2011-10-18
2204
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆經(jīng)過3~4輪的篩選后,應該能夠富集到能與受體特異性結(jié)合的噬菌體群體。通常而言,在后幾輪的篩選中,每次獲得的噬菌體總量都會增加,但是單就這個現(xiàn)象并不一定能說明已經(jīng)篩選到了受體特異性結(jié)合的肽段。能與靶分子非特異性結(jié)合或者能與篩選基質(zhì)的噬菌體克隆也會造成這一現(xiàn)象。噬菌體ELISA可以說是zui靈敏的鑒定所獲取的噬菌體克隆結(jié)合特異性的方法之一。受體被包被在各孔中,與之結(jié)合的噬菌體通過辣根過氧化物酶偶聯(lián)的抗M13噬菌體抗體檢測。只含有捕獲抗體或者...
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ABC-ELISA材料和方法
2011-10-12
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BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法(以篩選抗空腸彎曲菌共同抗原的單克隆抗體為例)1材料(1)空腸彎曲菌共同抗原提取物,自制。BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法(2)生物素化羊抗鼠IgG(BSAMG),衛(wèi)生部上海生物制品所。(3)ABC試劑,衛(wèi)生部上海生物制品所。如ABC試劑需自己配制,可按說明要求,將親和素與酶標生物素按一定比例混合,置37℃孵育30min后使用。(4)被檢雜交瘤培養(yǎng)物上清液。(5)其他試劑及器材同常規(guī)ELISA法。BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法2方法ABCEL...