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細(xì)胞研究*的細(xì)胞體積分析
2010-7-6
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生物、藥物等許多的研究均需要通過(guò)觀察細(xì)胞體積的變化或細(xì)胞數(shù)目增減的來(lái)判斷和評(píng)估實(shí)驗(yàn)的效果。由于細(xì)胞所處環(huán)境的改變可促使其自身體積做出相應(yīng)的變化,以便適應(yīng)改變后的環(huán)境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細(xì)胞體積變化規(guī)律,因此必須檢測(cè)其體積或細(xì)胞數(shù)目隨條件、時(shí)間的變化。細(xì)胞的發(fā)育與細(xì)胞分裂周期級(jí)數(shù)遞增均需要連續(xù)不斷的細(xì)胞增殖。在培養(yǎng)液中正在增殖的細(xì)胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對(duì)細(xì)胞發(fā)育與分裂的速度作如何調(diào)整才能保證細(xì)胞體積的不變并不明確。因此,測(cè)量細(xì)胞的體積的變...
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細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
2010-7-2
1337
二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個(gè)體和生存中起著非常重要的作用。它是細(xì)胞在一定生理?xiàng)l件下一系列順序發(fā)生事件的組合,是細(xì)胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過(guò)程。細(xì)胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征。在形態(tài)上可見(jiàn)凋亡細(xì)胞與周圍細(xì)胞脫離接觸,細(xì)胞變園,細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、細(xì)胞核固縮破裂呈團(tuán)塊狀或新月?tīng)罘植?、?nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進(jìn)一步融合將細(xì)胞分成多個(gè)完整包裹的凋亡小體,凋亡小體zui后被吞噬...
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T淋巴細(xì)胞的分離技術(shù)
2010-7-1
1529
(一)原理混合單個(gè)核細(xì)胞懸液在通過(guò)尼龍毛柱時(shí),B細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞和一些輔助細(xì)胞被選擇性粘附于尼龍毛上,而多數(shù)T細(xì)胞則通過(guò)尼龍毛柱,這是獲得富含T細(xì)胞群的有效方法。(二)材料及試劑1.尼龍毛(FemwallLaboratories,LP-1LeukoqakleukocyteFilters)。2.燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3.裝填尼龍毛柱,一次性注射器。4.取自然沉降的上層血漿,過(guò)聚蔗糖—泛影葡胺分層液后,獲取的血漿和分層液之間的單個(gè)核細(xì)胞層。(三)操作方法1.尼龍毛...
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細(xì)胞凋亡的幾種檢測(cè)方法
2010-6-30
1592
一、形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細(xì)胞呈圓形,胞核深染,胞質(zhì)濃縮,染色質(zhì)成團(tuán)塊狀,細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細(xì)胞核呈黃綠色熒光,胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè),可見(jiàn)細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺(tái)盼藍(lán)染色:如果細(xì)胞膜不完整、破裂,臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞變藍(lán),即為壞死。如果細(xì)胞膜完整,細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色,則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對(duì)反映細(xì)胞膜的完整性,區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察:...
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生物傳感器的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用
2010-6-25
2293
一、引言從1962年,Clark和Lyonszui先提出生物傳感器的設(shè)想距今已有40年。生物傳感器在發(fā)酵工藝、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品工程、臨床醫(yī)學(xué)、軍事及軍事醫(yī)學(xué)等方面得到了深度重視和廣泛應(yīng)用。在zui初15年里,生物傳感器主要是以研制酶電極制作的生物傳感器為主,但是由于酶的價(jià)格昂貴并不夠穩(wěn)定,因此以酶作為敏感材料的傳感器,其應(yīng)用受到一定的限制。近些年來(lái),微生物固定化技術(shù)的不斷發(fā)展,產(chǎn)生了微生物電極。微生物電極以微生物活體作為分子識(shí)別元件,與酶電極相比有其獨(dú)到之處。它可以克服價(jià)格昂貴...
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小鼠單個(gè)核細(xì)胞分離一步梯度法去除死細(xì)胞
2010-6-24
1977
基本原理活細(xì)胞(密度較?。┖退兰?xì)胞(密度較大)密度不同,從而有助于將活的淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞分離。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸鈉;PharmaciaLKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯離心管(比聚苯乙烯離心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關(guān);該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應(yīng)注意使細(xì)胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會(huì)因...