大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

使用目的：

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）水平。用純化的大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1），再與HRP標記的β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）濃度。 

試劑盒組成 

1 20倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 3ml×1瓶

2 酶標試劑 3ml×1瓶 8 標準品（160U/L） 0.5ml×1瓶

3 酶標包被板 12孔×4條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

4 樣品稀釋液 3ml×1瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2張  

6 顯色劑B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1個

標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

計算

  以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。 

注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月