大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書 
試劑盒組成
1包被微孔板：一塊。
2酶標(biāo)記物：1
瓶[6.0mL]，有效期內(nèi)使用。
3底物Ⅰ：1
瓶[6.0mL]，有效期內(nèi)使用。
4底物Ⅱ：1
瓶[6.0mL]，有效期內(nèi)使用。
5濃縮清洗液[1：10
蒸餾水或純凈水稀釋]：1
瓶[50mL]，有效期內(nèi)使用。
6終止液：1
瓶[6.0mL]，有效期內(nèi)使用。
7標(biāo)準(zhǔn)品：5
瓶[1.0mL/瓶]，有效期內(nèi)使用。
8 檢測范圍及各標(biāo)準(zhǔn)品濃度：0，50，100，250，500pg/mL。
大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書需要但未提供的試劑和器材
◆水溫箱或恒溫箱
◆標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
◆自動(dòng)洗板機(jī)
◆樣本稀釋液
◆可調(diào)節(jié)移液器及配套吸頭
◆蒸餾水和容量瓶
◆無菌試管
◆ 震蕩器及磁力攪拌器
◆ 封板膜
注意事項(xiàng)
1在試驗(yàn)之前要將試劑盒在室溫下平衡至少30分鐘。
2使用之前一定要首先確認(rèn)試劑盒內(nèi)所有試劑均為正常狀態(tài)再進(jìn)行后面的操作。
3如有問題或不懂之處請務(wù)必與供貨商進(jìn)行溝通，否則造成的任何損失均與本司
無關(guān)。
4 不要重復(fù)使用手中的吸頭和試管以及混淆各組分瓶蓋，否則會(huì)引起交叉污染，
導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。
5該試劑盒內(nèi)不包含有傳染性試劑。
6不要混用不同指標(biāo)不同批號的試劑和包被微孔板。
7試驗(yàn)過程中試劑和待測樣品均應(yīng)充分混勻。
8包被微孔板應(yīng)放置2-8℃干燥保存，避免受潮。
9如有剩余試劑請放置2-8℃冷藏保存。
10試驗(yàn)過程要嚴(yán)格按照說明書操作，先后順序不得顛倒。
11如果樣品量較大應(yīng)注意加樣時(shí)間，避免加樣過慢或間隔時(shí)間過長。
12使用和貯存底物Ⅱ時(shí)應(yīng)注意避光。
13終止液含有酸性成分具有腐蝕性，勿將其濺落到皮膚或衣服上。如有該情況發(fā)生應(yīng)立即使用冷水沖洗。
14試驗(yàn)期間室內(nèi)溫度應(yīng)始終保持在20-25℃。并保持室內(nèi)清潔，無粉塵。
15避免直接接觸試劑盒內(nèi)的液體，一旦接觸請盡快用水清洗。
16在試驗(yàn)過程中不要吸煙、使用化妝品和吃喝。這將對操作者的健康及試驗(yàn)結(jié)果造成影響。
17不要用嘴吸取試劑瓶內(nèi)的試劑。
大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書樣品的采集和制備
1 收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。
對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本儲(chǔ)存在2-8℃?zhèn)溆?如有特殊原因需要周期檢測,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,并避免反復(fù)凍融。樣本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃條件下可保存1個(gè)月，-70
℃條件下可保存6個(gè)月。
2每個(gè)樣品量收集體積[100ul×需檢測的指標(biāo)，注：樣品體積為處理后可進(jìn)行zui終實(shí)驗(yàn)的樣品體積]。
3 [血清]操作過程中避免受到刺激，使用非焦化和不含有內(nèi)毒素的試管，靜脈穿刺收集血
液并迅速離心，
分離出血清[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心，具體離心的時(shí)間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。zui終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。
4 [血漿]可使用
EDTA[2.0%EDTA.Na2]來抗凝血漿并用于檢測，混合10-20分鐘后,離心祛除顆粒[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心，具體離心的時(shí)間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。zui終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。
5 [組織勻漿/細(xì)胞培養(yǎng)液（分泌性成分）]使用無菌管收集。離心后取上清液[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心，具體離心的時(shí)間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。zui終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。 組織勻漿:切割標(biāo)本，稱取質(zhì)量。加入PBS[7.0-7.4]充分混合，具體的混合比例由操作者自行決定或可參考相關(guān)文獻(xiàn)，如有問題也可與供貨商咨詢溝通后再進(jìn)行后續(xù)操作。混合后的緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶），充分混合。 細(xì)胞培養(yǎng)液（胞內(nèi)成分）:應(yīng)先用
PBS[7.0-7.4]稀釋細(xì)胞懸液,使細(xì)胞濃度達(dá)到 100萬/mL左右,使用細(xì)胞裂解液或通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6 [體液]離心后祛除顆粒和聚合物[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。具體離心的時(shí)間和轉(zhuǎn)速應(yīng)根據(jù)樣品來決定。zui終實(shí)驗(yàn)的樣品應(yīng)為干凈透明狀的。
7 不要使用高脂血癥、溶血、污染或滅活的樣品，這樣有可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。