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人elisa試劑盒的檢測基礎(chǔ)是什么,你知道嗎?

2022-02-24 [775]
  人elisa試劑盒ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
 
  人elisa試劑盒適用于體外定量測定人血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液,細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中的CTGF。樣品溶血會影響結(jié)果,不能檢測到溶血標本。進行測定時,應將樣品置于室溫。
 
  人elisa試劑盒檢測原理:ELISA試劑盒,就是用ELISA的方法定量檢測CTGF的試劑盒。它的檢測原理:夾心酶免疫測定樣本中的CTGF的量,捕獲抗體已預孵育在板子上,然后將標準品或樣品與CTGF特異的生物素偶聯(lián)抗體制劑一起添加到合適的微量滴定板孔中;接下來,將結(jié)合到辣根過氧化物酶(HRP)的親和素加入到每個微板孔中孵育;加入TMB底物溶液后,只有那些包含CTGF、生物素結(jié)合抗體和酶結(jié)合抗生物素的孔才會顯示顏色變化;通過添加硫酸溶液終止酶-底物反應,并在450nm±10nm的波長處用分光光度法測量顏色變化;將樣品的OD值與標準曲線比較,確定CTGF在樣品中的濃度。
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